מהי בדיקת אנדוטוקסינים?

מהי בדיקת אנדוטוקסינים?

אנדוטוקסינים הם מולקולות הידרופוביות המהוות חלק מתסביך הליפופוליסכריד היוצר את רוב הממברנה החיצונית של חיידקים גראם שליליים.הם משתחררים כאשר החיידקים מתים והקרומים החיצוניים שלהם מתפוררים.אנדוטוקסינים נחשבים כתורמים העיקריים לתגובה הפירוגנית.ומוצרים פרנטרליים המזוהמים בפירוגנים יכולים להוביל להתפתחות חום, זירוז תגובה דלקתית, הלם, אי ספיקת איברים ומוות בבני אדם.

בדיקת אנדוטוקסינים היא הבדיקה לאיתור או לכמת אנדוטוקסינים מחיידקים גראם שליליים.

ארנבות מועסקות בהתחלה כדי לזהות ולכמת אנדוטוקסינים במוצרים פרמצבטיים.לפי USP, ה-RPT כולל מעקב אחר עלייה בטמפרטורה או חום לאחר הזרקה תוך ורידית של התרופה לארנבות.ו-21 CFR 610.13(b) דורש בדיקת פירוגן של ארנבת עבור מוצרים ביולוגיים שצוינו.

בשנות ה-60, פרדריק באנג וג'ק לוין גילו שאמבוציטים של סרטן הפרסה יקרישו בנוכחות אנדוטוקסינים.הLimulus Amebocyte Lysate(או Tachypleus Amebocyte Lysate) פותחה בהתאם כדי להחליף את רוב ה-RPT.ב-USP, בדיקת LAL מכונה בדיקת האנדוטוקסין החיידקית (BET).ו-BET יכול להיעשות באמצעות 3 טכניקות: 1) טכניקת ג'ל-קריש;2) הטכניקה הטורבידימטרית;3) הטכניקה הכרומוגנית.הדרישות לבדיקת LAL מכילות pH אופטימלי, חוזק יוני, טמפרטורה וזמן הדגירה.

בהשוואה ל-RPT, BET מהיר ויעיל.עם זאת, BET לא יכול היה להחליף את RPT לחלוטין.מכיוון שבדיקת LAL עשויה להיות מופרעת על ידי גורמים והיא אינה מסוגלת לזהות פירוגנים שאינם אנדוטוקסינים.